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腫瘤細(xì)胞系是一種強(qiáng)大有效的模型系統(tǒng)
發(fā)布日期:
2019-02-20
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腫瘤細(xì)胞系是連續(xù)細(xì)胞系,而連續(xù)細(xì)胞系的定義就是在體外可以穩(wěn)定的傳代半年以上。但看到ATCC的技術(shù)文章,說高傳代數(shù)的細(xì)胞系在細(xì)胞形態(tài)學(xué)、應(yīng)激反應(yīng)、生長率、蛋白表達(dá)、轉(zhuǎn)染和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)上都與低傳代數(shù)的細(xì)胞系有區(qū)別。并舉了前列腺腺癌細(xì)胞系LNCaP的例子,說明傳代數(shù)高的細(xì)胞系(傳代80代左右)對雄激素和視黃醇的反應(yīng)不同。
腫瘤細(xì)胞系是一種強(qiáng)大有效的模型系統(tǒng)。它可以被無限培養(yǎng)增殖,而且可以通過進(jìn)行各種操作來考察癌細(xì)胞對于抗癌藥物的敏感性,從而研究抗癌藥物產(chǎn)生療效的分子機(jī)制。腫瘤學(xué)研究通過研究癌細(xì)胞系,在癌組織對于藥物的敏感性,以及相關(guān)的特異基因的作用等各方面都獲得了相當(dāng)程度的理解。近年來,通過改變癌細(xì)胞的關(guān)鍵基因組成以及對其進(jìn)行基因表達(dá)分析,病理學(xué)家們能夠進(jìn)行越來越準(zhǔn)確的病情診斷。
腫瘤細(xì)胞系傳代方法:
收到細(xì)胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。
(一)如果細(xì)胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。
?。ǘ┤绻?xì)胞已長滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。
腫瘤細(xì)胞系*培養(yǎng)基特別添加能有效改善細(xì)胞生長狀態(tài)的營養(yǎng)物質(zhì)和針對不同物種特別甄選的培養(yǎng)液,適合各類腫瘤細(xì)胞系的體外培養(yǎng)。