澳洲進口胎牛血清里有大片沉淀,這個正常嗎?
•說明1: 血清非人工產(chǎn)品,有些東西沉淀出來系自然現(xiàn)象
–纖維蛋白原
–鹽析出。如磷酸鈣等
–膽固醇和脂肪酸
–蛋白析出
•說明2: 沉淀在下列情況下還會增加:
–熱滅活
–37℃培養(yǎng) (常常由此引發(fā)歧異)
–反復凍融
–熔化中沒有搖勻
–gamma 照射
–長期存放在 2-8°C
•另外我們還發(fā)現(xiàn):
-血清加入到RPMI 1640中時,沉淀往往會發(fā)生或增加
–pH 升高時,沉淀會增加
–在培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿中,因為培養(yǎng)基的蒸發(fā)也會導致沉淀的增加
•說明3: 沉淀不會影響其對細胞的促生長作用
–我們的技術(shù)人員對此問題的深入研究證明
–我們的客戶試驗確認
–請注意一個例外:沉淀影響巨噬細胞的培養(yǎng)
•說明4: 這種現(xiàn)象發(fā)生在所有的血清中,包括我們的競爭對手.
–Gibco的網(wǎng)站上說 “GIBCO 的胎牛血清沒有預老化,如果存放在2-8℃,血清中的各種蛋白或酯類有可能會凝聚析出,出現(xiàn)沉淀或混濁. 這種現(xiàn)象不會影響血清對對細胞的促生長作用.我們建議把血清存放在 –20℃,并避免反復凍融。
-Sigma胎牛血清說明書中說: “在熔化過程中混濁多絮狀沉淀,這中現(xiàn)象對多數(shù)血清來說是正常的,并不影響其使用質(zhì)量
–其他品牌: “蛋白質(zhì)的沉淀并非不正常,即使按照說明正確進行血清的溶解過程中也不可避免。這種現(xiàn)象很正常,且不會影響血清的促生長作用.”這中沉淀對細胞培養(yǎng)也沒有毒害。但它影響血清的外觀,影響瓶與瓶之間的一致性.”
•說明5: 血清并沒有被污染.
–檢測血清是否被污染的方法是將血清接種到血酯板上,培養(yǎng)后看是否有菌落形成.
–在 1000x顯微鏡下,有經(jīng)驗的微生物學家通過觀察有無格蘭仕染色的細菌,也可以判斷血清是否被污染