胎牛血清作為細(xì)胞培養(yǎng)基中頂ji的主要天然成份,是生物實驗室*的耗材之一。近年來,隨著我國生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展,國內(nèi)胎牛血清的用量也與日俱增,但由于一系列原因,中國市場的胎牛血清質(zhì)量卻始終是參差不齊。那么該如何選擇適合的血清呢?
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、 多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質(zhì)對促進 細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。
胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。
顯然,胎牛血清是品質(zhì)gao的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細(xì)胞有害的成分少。
胎牛血清 產(chǎn)品描述:
1、胎牛血清,是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,其組成成份大部分已知,但還有一部分尚不清楚,這些物質(zhì)對促進細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。其中不含細(xì)胞、纖維蛋白和凝血因子。
2、胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)方面通常優(yōu)于其他類型的血清。由于胎牛從未接觸過外界, 與新生牛和小牛血清相比,抗體含量明顯降低,故抗體與培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生交叉反應(yīng)的風(fēng)險也較低,是理想的細(xì)胞生長補充劑。
胎牛血清 功能:
1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2. 提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3.有些情況下 結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和 熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。
5.起酸堿度 緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細(xì)胞不受傷害。
-20℃,避光。
在選擇血清時,應(yīng)格外留意篩選內(nèi)毒素:
1.養(yǎng)干細(xì)胞時,干細(xì)胞對內(nèi)毒素非常敏感,如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時,干細(xì)胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過提早審核該批次《檢測報告》,以決定是否入圍進行試用。
2.養(yǎng)免疫細(xì)胞時,過高的內(nèi)毒素可誘導(dǎo)免疫細(xì)胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細(xì)胞集落的形成等。
3.基因敲除相關(guān)的細(xì)胞實驗,培養(yǎng)的細(xì)胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導(dǎo)細(xì)胞衰老或凋亡的試劑,都會讓后續(xù)的實驗結(jié)果“失之毫厘,謬以千里”。在準(zhǔn)備血清和其他試劑時,選擇極低的內(nèi)毒素(≤1EU/ml),對實驗至關(guān)重要;
4.原代培養(yǎng)、雜交瘤融合、細(xì)胞轉(zhuǎn)染,或者肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、內(nèi)皮等難養(yǎng)細(xì)胞的擴增,這些都需要挑選好的血清給細(xì)胞以有力支持。因此,挑選更低的內(nèi)毒素,是保證實驗順利的第1步。
5.實驗室有些細(xì)胞,需要長期培養(yǎng)、長期凍存,或者經(jīng)常復(fù)蘇、經(jīng)常培養(yǎng)的,血清會經(jīng)?;蜷L時間作用于細(xì)胞。為保證細(xì)胞的健康,都應(yīng)該選用更低內(nèi)毒素的血清,以避免內(nèi)毒素長久對細(xì)胞的毒性影響。
總之,血清中內(nèi)毒素含量過高,更容易導(dǎo)致細(xì)胞“亞健康”,造成數(shù)據(jù)不準(zhǔn),或細(xì)胞狀態(tài)不良、老化、甚至死亡,導(dǎo)致試驗中斷失敗。血清中的內(nèi)毒素越低越好。
內(nèi)毒素含量越低的血清,級別就越高,以胎牛血清為例:
當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清;
當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量﹥10EU/ml,≤ 25EU/ml時,此血清為優(yōu)級胎牛血清;
當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≥ 25EU/ml時,此血清為標(biāo)準(zhǔn)級胎牛血清。
Noveres 品牌胎牛血清 *優(yōu)勢:
1. 精選內(nèi)毒素極低批次,干細(xì)胞等各類細(xì)胞的培養(yǎng)效果理想。
2. 新批次在試用前,提供試用服務(wù),養(yǎng)細(xì)胞更放心。
3. 提供血清冷庫代儲存服務(wù),為實驗室節(jié)約儲存空間,按要求隨時送貨
4. 免費無憂售后,所有實驗室簽收的Noverse胎牛血清,從簽收日開始計算,一年之內(nèi),血清在妥善保管、未開封未融化、且不影響二次銷售的情況下,均可享受無條件退貨或換貨的售后保障。
5. 隨時有2-3個批次平行供應(yīng),對于特殊需求的項目,可提供特別選擇空間。
6. 每個批號血清具有完整的檢驗報告,輻照報告,為臨床申報提供完整支持。
7. 提供支原體檢測,方法學(xué)驗證等更多延展服務(wù)。
8. Noueres血清從出廠,到實驗室,全程低溫冷鏈保護,確保血清無反復(fù)凍融。
Noverse品牌胎牛血清種類 簡介:
Noveres優(yōu)級胎牛血清:
貨號: NFBS-2500A
庫存:現(xiàn)貨
規(guī)格:500ml
簡介: 適用于一切常規(guī)基礎(chǔ)細(xì)胞的培養(yǎng),如:腫瘤細(xì)胞、常規(guī)細(xì)胞、簡單的原代細(xì)胞等。
Noveres補鐵型小牛血清:
貨號:NBCS-2500C
規(guī)格:500ml
庫存:現(xiàn)貨
簡介:適合用于較為簡單細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng),如:293t全系細(xì)胞。
Noveres特級胎牛血清:
貨號:NFBS-1500A
規(guī)格:500ml
庫存:現(xiàn)貨
簡介:適合用來培養(yǎng)一切嬌貴細(xì)胞,如:骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、各種原代細(xì)胞。
儲存條件:
-20°C凍存。
胎牛血清*解凍后,應(yīng)按單次習(xí)慣用量分裝,分裝后的血清仍-20°C凍存。
若置于4°C的血清,應(yīng)在一周內(nèi)用完。
為保證細(xì)胞培養(yǎng)的jia效果,血清和培養(yǎng)基的配置,應(yīng)遵循“現(xiàn)用現(xiàn)配”原則。配好的培養(yǎng)液,應(yīng)于一周內(nèi)用完。
血清避免反復(fù)凍融,避免在4°C或更高溫度儲存過久,否則會破壞血清中有效活性成分,影響血清品質(zhì)。
胎牛血清 使用說明:
血清從-20℃取出后,融化,按推薦體積加入到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,混勻,制備成新鮮*培養(yǎng)基。(整個操作需在無菌超凈臺中進行,注意無菌操作。)
關(guān)于熱滅活:胎牛血清不推薦熱滅活。
熱滅活一般是指在做免疫相關(guān)的試驗中,通過加熱滅活掉血清中的補體,以避免對免疫試驗的影響。
在胎牛血清中,由于胎齡原因,尚未形成完整的補體系統(tǒng),因此,胎牛血清不會真正干預(yù)免疫試驗。故不需滅活。并且,熱滅活反而可能導(dǎo)致胎牛血清中部分重要的生長因子的活性衰減,進而影響細(xì)胞培養(yǎng)效果。
若針對某些特殊試驗,對于胎牛血清一定要做熱滅活,上推薦熱滅活的方法:40℃水浴,20min。