胎牛血清從字面意思就可以知道是未出世的小牛的血清,很多哺乳動物的細胞培養(yǎng)試驗都是需要用到胎牛血清的,因此應用領域可謂甚廣,包含人類或者獸類的疫苗,生物制藥等等,胎牛血清可以有效的幫助我們把控質量! 胎牛血清的主要來源地就是那些大量養(yǎng)牛的國家,包括美國、澳大利亞、新西蘭、加拿大及南美和中美洲地區(qū),由政府機構管理血清制品的生產(chǎn)及收集過程。
胎牛血清不是可以直接使用的,不論是存儲還是使用都是相對來說較為復雜的,今天小編就與大家分享下一般的使用步驟:
胎牛血清的常規(guī)處理方式是熱鈍化,即放在56°水浴30分鐘;其目的是使血清中的補體成分及一些未知的細胞生長抑制分子失活。
實驗顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。
若非必須,可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時間,更確保血清的質量!
透析處理能夠除去胎牛血清中所有分子量小于10,000Da的分子。例如,激素、細胞因子、葡萄糖、氨基酸還有許多其它分子,都能夠被除去。透析也能除去胎牛血清中的抗生素及其它內源分子。
胎牛血清常規(guī)的滅菌方法是多次透過0.1um的濾膜以消除微生物污染,而gamma照射能夠鈍化牛群中常見的病毒。但是,一些類型的病毒能夠抵抗gamma照射,比如細小病毒。
后要注意的是:胎牛血清一般是在-5°到-20°之間凍存,2°到8°之間融化。一個比較好的辦法是,將胎牛血清分裝到50ml管中,這樣做就避免了反復凍融對血清造成的危害。血清融化后常出現(xiàn)沉淀,可能是血清蛋白變性造成的。簡短離心即可除去沉淀,并且,這些沉淀一般不會影響血清質量的。