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1凍存細(xì)胞取出后37℃速溶，取15ml離心管，加入10ml含血清培養(yǎng)基，將凍存管中液體（通常1.5ml）也加入離心管中，習(xí)慣輕吹幾下混勻，1200轉(zhuǎn)常溫離心5min，去掉上清，加入5ml含血清培養(yǎng)基，輕吹制成細(xì)胞懸液，加入到培養(yǎng)瓶中，即可。

注意，新復(fù)蘇的細(xì)胞不要經(jīng)常去看去動(dòng)。

換液的話(huà)，只要把培養(yǎng)基吸出，再加入新的培養(yǎng)基就可以了

如果你復(fù)蘇的細(xì)胞長(zhǎng)得很不均勻，可以胰酶消化下來(lái)再混勻后在重新加進(jìn)去（像正常細(xì)胞一樣做）。

兩種方案可供選擇：

一、復(fù)蘇時(shí)，行離心，棄上清后，種入瓶中。主要目的是防止DMSO對(duì)細(xì)胞造成損害，但剛復(fù)蘇的細(xì)胞教脆弱，離心易導(dǎo)致細(xì)胞破碎。

二、上皮細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)，直接將凍存管里的液體倒入培養(yǎng)瓶中，另外添加適量的培養(yǎng)基，孵箱24h，待貼壁后行常規(guī)換液。省去了離心一步，避免離心時(shí)細(xì)胞破裂。但DMSO未能去除，長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)可能會(huì)對(duì)細(xì)胞有損害。個(gè)人覺(jué)得第二種方案較方便。

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