EOL-1人類嗜酸性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞
產(chǎn)品名稱:EoL-1 cellS
中文名稱:人類嗜酸性粒細(xì)胞性白血??;人類嗜酸性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞株
代數(shù):第四代
運(yùn)輸方式:復(fù)蘇活細(xì)胞或凍存細(xì)胞
細(xì)胞數(shù)量:5*100000個(gè)
貨期:復(fù)蘇細(xì)胞10個(gè)工作日,凍存細(xì)胞2-3個(gè)工作日
EoL-1細(xì)胞,人類嗜酸性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞株比較嬌貴,養(yǎng)它如同養(yǎng)孩子,EoL-1細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)(細(xì)胞培養(yǎng)、培養(yǎng)基、胎牛血清、細(xì)胞活化與復(fù)蘇)更多詳細(xì)信息,請客服:!
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EOL-1細(xì)胞,人類嗜酸性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞株
Sum275細(xì)胞,
NB-1細(xì)胞,人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞株
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MOLM-14細(xì)胞,人急性髓性白血病細(xì)胞株GIBCO(1640+10%胎牛血清)
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COS-1成纖維細(xì)胞猴腎MEM, 10% 胎牛血清
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COS-7成纖維細(xì)胞猴非洲綠猴腎MEM, 10% 胎牛血清
Vero成纖維細(xì)胞猴非洲綠猴腎199培養(yǎng)基,5% 胎牛血清
B95-8成淋樣絨猴EB病毒感染的白血病細(xì)胞RPMI-1640, 10% 胎牛血清
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WISH上皮細(xì)胞人羊膜BME, 10% 胎牛血清
WS1 人胚胎皮膚MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA
HUVEC內(nèi)皮細(xì)胞人臍帶F-12K, 10% 胎牛血清 和 肝素鹽 100 ug/ml
EB-3淋巴樣人Burkitt淋巴瘤RPMI-1640, 10% 胎牛血清
Raji淋巴樣人Burkitt淋巴瘤RPMI-1640, 10% 胎牛血清
IM-9成淋巴細(xì)胞人骨髓瘤病人骨髓RPMI-1640, 10% 胎牛血清
Daudi成淋巴細(xì)胞人 淋巴瘤病人血液RPMI-1640, 10% 胎牛血清
H9成淋巴細(xì)胞人 T細(xì)胞淋巴瘤RPMI-1640, 20% 胎牛血清
HL-60成淋巴細(xì)胞人 早幼粒細(xì)胞白血病RPMI-1640, 20% 胎牛血清
Jurkat成淋巴細(xì)胞人 T細(xì)胞白血病RPMI-1640, 10% 胎牛血清
K-562成淋巴細(xì)胞人 骨髓性的白血病RPMI-1640, 10% 胎牛血清
U937淋巴樣人 組織細(xì)胞淋巴瘤RPMI-1640, 10% 胎牛血清
KG-1骨髓白細(xì)胞人紅白血病病人骨髓IMDM, 20% 胎牛血清
McCoy成纖維細(xì)胞小鼠未知MEM, 10% 胎牛血清
BALB/3T3成纖維細(xì)胞小鼠胚胎DMEM, 10% 胎牛血清
3T6成纖維細(xì)胞小鼠胚胎DMEM, 10% 胎牛血清
A9成纖維細(xì)胞小鼠結(jié)締組織DMEM+10% 胎牛血清+6-硫鳥嘌呤(30μg/ml)+2,6-二氨基嘌呤(30μg/ml)
AtT-20上皮細(xì)胞小鼠垂體腫瘤F-10, 15% 馬血清和2.5% 胎牛血清
Clone M-3上皮細(xì)胞小鼠黑素瘤F-10, 15% 馬血清和2.5% 胎牛血清
I-10 上皮細(xì)胞小鼠睪丸癌 F-10, 15% 馬血清和2.5% 胎牛血清
Y-1上皮細(xì)胞小鼠腎上腺瘤F-10, 15% 馬血清和2.5% 胎牛血清
WEHI-3b類巨噬細(xì)胞小鼠骨髓單核細(xì)胞白血病DMEM, 10% 胎牛血清
ES-D3胚胎型小鼠多能胚胎干細(xì)胞DMEM+ 15% 胎牛血清+100μmol/L 2-巰基丙醇
F9胚胎型至內(nèi)胚層小鼠睪丸畸胎癌DMEM, 15% 胎牛血清
BHK-21成纖維細(xì)胞倉鼠腎GMEM, 10% 胎牛血清 或MEM, 10% 胎牛血清 和NEAA
HaK上皮細(xì)胞倉鼠腎BME, 10% 小牛血清
CHO-K1上皮細(xì)胞倉鼠卵巢F-12, 10%胎牛血清
AR42J.大鼠胰腺腫瘤Ham"sF-12K, 20%胎牛血清
BRL3A.大鼠肝Coon"sF-12K, 5%胎牛血清
Clone 9上皮細(xì)胞大鼠肝臟F-12K, 10%胎牛血清
H4--Ⅱ-E-C3上皮樣大鼠肝癌F-12K, 10%胎牛血清`
GH1上皮細(xì)胞大鼠垂體腫瘤F-10, 15% 馬血清和2.5% 胎牛血清
GH3上皮細(xì)胞大鼠垂體腫瘤F-10, 15% 馬血清和2.5% 胎牛血清
IEC-6上皮樣大鼠正常小腸DMEM, 5% 胎牛血清,胰島素(insulin)0.1μg/ml
L2上皮細(xì)胞大鼠肺F-12K, 10%胎牛血清
收到細(xì)胞株包裹時(shí), 請檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請立即通知。細(xì)胞株請盡速開始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對細(xì)胞造成損害。
EOL-1人類嗜酸性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞
操作步驟:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項(xiàng):
1.動作要快,胰酶消化,換液什么,細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時(shí)間,所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,很多時(shí)候是傳代的原因。
3.有時(shí)間的話,需要細(xì)胞計(jì)數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線,不會臨時(shí)要處理,手足無措。
3.要做什么心里要非常清楚,合理安排時(shí)間,細(xì)胞房的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行,可以節(jié)省很多時(shí)間,也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn)。
4.個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套,不要和別人混用,zui近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟。
5.細(xì)胞房不能進(jìn)去太多人,避免相互干擾。