HC-OA成人軟骨細胞-骨性關節(jié)炎
生長狀態(tài): | 凍存細胞 |
年限: | 1-2年 |
運輸方式: | 干冰運輸,液氮保存 |
是否是腫瘤細胞: | 否 |
物種來源: | Human |
組織來源: | 骨性關節(jié)炎患者的關節(jié)軟骨.每個批次經檢測均不含有HIV、HBV、HCV、支原體、細菌和真菌 |
細胞類型: | 原代細胞 |
供應商: | Cell Applications |
數量: | 第1代時凍存于含有 10% FBS 和 10% DMSO 的基礎培養(yǎng)基,細胞數>500,000 cells/ml. |
規(guī)格: | 1 Ampoule |
Cat.#402OA-05a
人軟骨細胞-骨性關節(jié)炎,成人,Human Chondrocyte-Osteoarthritis(HC-OA), adult。HC-OA來源于骨性關節(jié)炎患者的關節(jié)軟骨,第1代時凍存于含有 10% FBS 和 10% DMSO 的基礎培養(yǎng)基,細胞數量>5×105cells/ml ,可以達到10倍增。每個批次經檢測均不含有HIV、HBV、HCV、支原體、細菌和真菌。
推薦培養(yǎng)基:411-500、411K-500
運輸條件: 干冰運輸、 液氮保存
推薦產品:
Description | Size | Cat.# |
cryopreserved Human Chondrocyte-Osteoarthritis(HC-OA), adult 人軟骨細胞-骨性關節(jié)炎,成人 | 1 Kit/1 Ampoule | 402OAK-05a/402OA-05a |
Chondrocyte Basal Medium 軟骨細胞基礎培養(yǎng)基 | 500ml | 410-500 |
Chondrocyte Growth Medium 軟骨細胞培養(yǎng)基-預混 | 500ml | 411-500 |
Chondrocyte Growth Medium Kit 軟骨細胞培養(yǎng)基-套裝 | Yields 500 ml | 411K-500 |
Chondrocyte Differentiation Medium 軟骨細胞分化培養(yǎng)基 | 250 ml | 411D-250 |
Chondrocyte Growth Supplement 軟骨細胞生長添加劑 | 50ml | 411-GS |
Subculture Reagent Kit 傳代培養(yǎng)試劑盒 | 100ml | 090K |
HC-OA成人軟骨細胞-骨性關節(jié)炎
"細胞培養(yǎng)三不要:
養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學研究的基本功。有三個小經驗可以和大家分享一下:
1. 不要燒瓶口。大多數人都喜歡在酒精燈的火焰上關瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進入瓶內。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養(yǎng)基中的碳酸就會轉化成二氧化碳,釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,當然會變堿。如果不燒瓶口的話,你會發(fā)現培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。細胞(當然多多少少還是會有一點越用越堿,因為室溫還是比冰箱內的溫度高)
其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會發(fā)現根本就不會燒疼。如果有細菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內從來就不燒瓶口。來美國以后發(fā)現這里更*,超凈臺內根本就不點酒精燈。
2. 不要頻繁看細胞。對于初學者而言,養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣,有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好,就越是經常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處,特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞,培養(yǎng)瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經??梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎?,細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管,細胞瘋長。
3. 不要怕消化。在傳代的時候,初學者往往生怕細胞消化過度,早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,用力吹打對細胞的損傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候,37度消化過夜,細胞也沒事。我一般是等細胞*變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有,動作要輕柔,盡量不要產生氣泡。
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:
無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70 % ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風扇運轉數分鐘后,才開始實驗操作。
每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70 % ethanol擦拭無菌操作抬面。
無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內。實驗操作應在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。
小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約 45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。
瓶裝血清一定要逐步解凍: 4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃ 解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀。
熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響