SN12C人腎癌細胞
【背景資料】 見細胞說明書
【產(chǎn)品來源】 細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學建系
公司提供貼壁、半貼壁、懸浮、半懸浮、貼壁與懸浮混合等細胞特性,一般細胞培養(yǎng)PBS量是10%,如果出現(xiàn)細胞狀態(tài)不良情況,可以提高PBS量到15%,待細胞穩(wěn)定后,調(diào)回PBS量10%,對于初次實驗者,一般細胞培養(yǎng),都需要加入雙抗防止細胞污染,細胞匯合度達到90%,我們開始寄送,這樣可以保持細胞收到時,良好的細胞活力。
復蘇細胞注意事項:
1收到細胞后當天換液,全部更換成客戶自己的新鮮培養(yǎng)基,放進培養(yǎng)箱,第二天再消化。
2邊觀察邊消化,根據(jù)細胞的形態(tài),終止消化時間,采取以半分鐘間隔吹打細胞邊緣,如可吹打下來,即終止消化??蛻裘鞅容^好的消化時間。
3隨細胞有一份細胞操作說明書,請客戶仔細查看。
4記得加1%雙抗,降低被污染的概率。另外盡早凍存留種,以備后用。
5售后時間為一周,僅限于細胞本身的質(zhì)量問題,而因乙方自己不當操作(不規(guī)范操作,消化過度,不加雙抗導致的污染等)導致的細胞問題不在售后范疇。
6收到細胞后,如細胞狀態(tài)不佳,或培養(yǎng)中遇到問題,煩請當天盡快聯(lián)系,以便處理。當天及時反饋細胞情況和細胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù),請您務必重視。
7剛收到細胞時,胎牛血清可以用15%培養(yǎng)兩三天,利于細胞盡快恢復狀態(tài),細胞狀態(tài)穩(wěn)定后,再調(diào)回10%即可。
(其中1,2條針對于貼壁細胞,懸浮細胞詳情請見細胞操作說明書)" P4
【產(chǎn)品包裝】 復蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管(兩支)
【產(chǎn)品規(guī)格】 1*10(6)
【安全級別】 1
【產(chǎn)品種屬】 人
【組織來源】 腎
【細胞形態(tài)】 上皮細胞樣
【細胞特性】 貼壁
"細胞培養(yǎng)基的選擇和使用:
MEM:成分簡單,貼壁細胞。
DMEM:分高糖型和低糖型。
IDMEM:適合細胞密度低,生長困難的細胞。如雜交細胞的篩選,DNA轉(zhuǎn)染后轉(zhuǎn)化細胞的篩選培養(yǎng)。
RPM1640:應用*泛的培養(yǎng)基之一。懸浮細胞培養(yǎng),主要針對淋巴細胞,也適合其他細胞。
199、109培養(yǎng)基:成分齊全,培養(yǎng)效果較好。
F10培養(yǎng)基:適合小鼠及人類二倍體細胞培養(yǎng)。
F12培養(yǎng)基:適合單細胞分離培養(yǎng)及無血清培養(yǎng)。
McCoy’s5A培養(yǎng)基:特別適合原代細胞及較難培養(yǎng)細胞的生長。" 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
【細胞檢測】 細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
【培養(yǎng)條件】 詳見細胞說明書
【傳代方法】 建議1:2-1:3 兩天換液一次
【凍存條件】 詳見細胞說明書
【主要文獻】 請具體查閱相關發(fā)表文章
SN12C人腎癌細胞
貼壁細胞接收后的操作流程與注意事項
1.收到細胞當天盡快更換新鮮*培養(yǎng)基,第二天再進行消化處理
2.如果細胞收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)觀察。同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,培養(yǎng)觀察
3.若出現(xiàn)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)
貼壁細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)
1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加適量0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間)
2.鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂?。┤サ粢让?,加6~8ml *培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散
3.取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)?培養(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項作或者凍存