SW480人結(jié)腸癌細(xì)胞
【儲存條件】低溫保存
【產(chǎn)品商標(biāo)】ATCC
【供應(yīng)限制】僅供科研使用
細(xì)胞培養(yǎng)的準(zhǔn)備工作一定要做充分,準(zhǔn)備至少兩套高溫高壓消毒后的物品,做新的操作時先檢點(diǎn)所有的東西是否準(zhǔn)備齊全,比如配液時的濾器,分裝所用的容器是不是足夠等等。所有實(shí)驗(yàn)物品,包括自己配的液體和購買的產(chǎn)品,都要標(biāo)記清楚(比如名稱,PH值、時間、還有自己的名字,如果是共用一個冰箱的話這一點(diǎn)很重要)。凍存的物品盡量避免反復(fù)凍融,如果無法避免,也要盡早分裝,一次用完。細(xì)胞計(jì)數(shù)在開始培養(yǎng)時很有必要,但計(jì)數(shù)次數(shù)多了經(jīng)驗(yàn)估計(jì)法也是很好的辦法,必竟每次計(jì)數(shù)也不是那么精確,而細(xì)胞培養(yǎng)對計(jì)數(shù)也不是那么要求嚴(yán)格。 一瓶細(xì)胞培養(yǎng)用液體盡量不要反復(fù)使用,這將增大污染機(jī)率??捎玫霓k法即是將其分裝成適當(dāng)規(guī)格,一次用1瓶。細(xì)胞培養(yǎng)板或瓶若要摞在一起的話,注意在箱內(nèi)不要超過3層,否則,中間的會受熱不均,嚴(yán)重影響細(xì)胞質(zhì)量,可造成細(xì)胞生長不均勻,可能造成中間稀少,四周密集。
SW480人結(jié)腸癌細(xì)胞
發(fā)貨方式:
復(fù)蘇后發(fā)貨:我們復(fù)蘇細(xì)胞后發(fā)貨,貨期一周左右,免運(yùn)費(fèi)。(氣溫較好建議復(fù)蘇后發(fā)貨)
凍存發(fā)貨(干冰運(yùn)輸):需額外增加干冰運(yùn)費(fèi),選擇干冰運(yùn)輸?shù)奈覀儼l(fā)兩管細(xì)胞,為了保證客戶接種可靠性多發(fā)一管。(氣溫低于0℃須凍存發(fā)貨)
細(xì)胞發(fā)貨采取專業(yè)的運(yùn)輸包裝,并選擇最快捷的運(yùn)輸方式(順豐速運(yùn)或其他空運(yùn)快遞)
細(xì)胞處理方法:
一、貼壁細(xì)胞
1、 接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞 100X,200X 各一張)。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝。
3、嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4、37度平衡1-2小時。
5、用移液管吸取培養(yǎng)基,到50ml離心管中,剩下細(xì)胞密度達(dá)到80%至90%可以傳代,如沒有達(dá)到添加6ml新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
6、如果肉眼檢查上清有細(xì)胞,對50ml上清進(jìn)行離心收集細(xì)胞,如果細(xì)胞連片狀態(tài),棄掉上清對收集的細(xì)胞進(jìn)行胰酶消化(1ml胰酶37度),接種培養(yǎng)。
二、懸浮細(xì)胞
1、接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞 100X,200X 各一張)。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝。
3、嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4、細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5、1000rpm,5min 離心,用吸管小心吸出上清,加入培養(yǎng)基,重懸細(xì)胞。
6、將重懸好的細(xì)胞轉(zhuǎn)入六孔板或者細(xì)胞培養(yǎng)瓶種,加入新鮮培養(yǎng)基,置于 37℃,5%CO2 培養(yǎng)(大部分細(xì)胞)。