HLE肝癌細胞
【背景資料】 見細胞說明書
【產(chǎn)品來源】 細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學建系
公司提供貼壁、半貼壁、懸浮、半懸浮、貼壁與懸浮混合等細胞特性,一般細胞培養(yǎng)PBS量是10%,如果出現(xiàn)細胞狀態(tài)不良情況,可以提高PBS量到15%,待細胞穩(wěn)定后,調回PBS量10%,對于初次實驗者,一般細胞培養(yǎng),都需要加入雙抗防止細胞污染,細胞匯合度達到90%,我們開始寄送,這樣可以保持細胞收到時,良好的細胞活力。復蘇細胞注意事項:
1收到細胞后當天換液,全部更換成客戶自己的新鮮培養(yǎng)基,放進培養(yǎng)箱,第二天再消化。
2邊觀察邊消化,根據(jù)細胞的形態(tài),終止消化時間,采取以半分鐘間隔吹打細胞邊緣,如可吹打下來,即終止消化。客戶摸索比較好的消化時間。
3隨細胞有一份細胞操作說明書,請客戶仔細查看。
4記得加1%雙抗,降低被污染的概率。另外盡早凍存留種,以備后用。
5售后時間為一周,僅限于細胞本身的質量問題,而因乙方自己不當操作(不規(guī)范操作,消化過度,不加雙抗導致的污染等)導致的細胞問題不在售后范疇。
6收到細胞后,如細胞狀態(tài)不佳,或培養(yǎng)中遇到問題,煩請當天盡快聯(lián)系,以便處理。當天及時反饋細胞情況和細胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù),請您務必重視。
7剛收到細胞時,胎牛血清可以用15%培養(yǎng)兩三天,利于細胞盡快恢復狀態(tài),細胞狀態(tài)穩(wěn)定后,再調回10%即可。
HLE肝癌細胞
細胞培養(yǎng)三不要:
養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下:
1. 不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養(yǎng)基中的碳酸就會轉化成二氧化碳,釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,當然會變堿。如果不燒瓶口的話,你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿,因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高)
其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來美國以后發(fā)現(xiàn)這里更*,超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈。
2. 不要頻繁看細胞。對于初學者而言,養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣,有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好,就越是經(jīng)常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處,特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞,培養(yǎng)瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經(jīng)常可以看到新手一天到晚都在看細胞,細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管,細胞瘋長。
3. 不要怕消化。在傳代的時候,初學者往往生怕細胞消化過度,早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,用力吹打對細胞的損傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候,37度消化過夜,細胞也沒事。我一般是等細胞*變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有,動作要輕柔,盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機械應力相當大,對細胞的傷害也是很大的。,公司專業(yè)提供美國ATCC細胞庫來源正常細胞系、腫瘤細胞系、癌細胞系(三千多種),提供細胞株生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態(tài)、培養(yǎng)條件、應用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息,我們擁有豐富的細胞系培養(yǎng)經(jīng)驗,能提供細胞培養(yǎng)*的技術支持,讓您實驗再無煩擾!