對于每種細胞因子應(yīng)仔細閱讀說明書,注意每批的細節(jié)。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。
來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學(xué)實驗等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實驗室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務(wù)。
服務(wù)流程:
預(yù)約登記→辦理相關(guān)手續(xù)→復(fù)蘇細胞→細胞質(zhì)量檢查→發(fā)送細胞(或自己來取細胞)→細胞售后技術(shù)咨詢答疑。
培養(yǎng)方法如下:
1、從手術(shù)室無菌取腦髓灰質(zhì)或白質(zhì)后,仔細剝除腦膜、血管和纖維成分,置Hanks液中漂洗一、二次。
2、置于30—50倍體積的Hanks液中,此時腦組織比較柔軟,反復(fù)吹打即制成細胞懸液。
3、把懸液注入離心管室溫中直立5—10分鐘后,細胞或細胞團快自然下沉,脂肪等雜物易漂浮,可吸除上層、反復(fù)二、三次,即可排除脂肪成分和其它碎塊并獲較多細胞成分。
4、在沉降物中加入適量培養(yǎng)液,通過紗網(wǎng)成紗布過濾,計數(shù)并調(diào)整細胞密度。
5、接入培養(yǎng)瓶或皿中,置5%CO2溫箱中培養(yǎng)。適應(yīng)環(huán)境過程較長,接種后貼壁較慢。貼壁后短期內(nèi)也可能不見細胞分裂現(xiàn)象,然而一旦生長后即能迅速進入旺盛的增殖狀態(tài)。細胞傳代可以0.25%胰酶消化處理。
注意事項:
1.收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2.先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置數(shù)小時(4h左右),穩(wěn)定細胞狀態(tài),切忌在溫箱內(nèi)靜置過夜。
3.靜置后鏡檢,拍照,記錄細胞狀態(tài)。建議傳代后也拍照記錄細胞生長情況。
4. 懸浮細胞:將細胞瓶內(nèi)液體都轉(zhuǎn)移至無菌離心管內(nèi),1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心5min,培養(yǎng)基上清可備用,管底細胞沉淀用培養(yǎng)基重懸。鏡檢時若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞瓶內(nèi)培養(yǎng);若密度未超過80%,細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),待達到80%時再正常傳代。備注:聚團生長慢,有密度依賴,必須使用T25培養(yǎng)瓶豎立培養(yǎng),3天一次半量換液一次,1-2周傳代一次。
貼壁細胞:若細胞密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,收集細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,留8ml繼續(xù)培養(yǎng)至80%左右再傳代,瓶蓋可稍微擰松。備注:細胞貼壁慢,傳代后細胞放2天不動。
5.細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基含血清和雙抗,可收集后4℃保存?zhèn)溆?,可補加2%血清。剛開始傳代時建議一半用細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,一半用客戶自備的培養(yǎng)基,使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件,以免因不適應(yīng)而造成生長狀態(tài)不佳。
6.因為培養(yǎng)過程外因太多,所以我們的售后保障期為一周,超過一周的細胞我們會酌情處理,但不提供免費更換服務(wù)。
ZYC3401 小鼠結(jié)腸癌細胞 MC38 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3402 人腎透明細胞癌細胞 Caki-2 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3403 小鼠小膠質(zhì)細胞 BV-2 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3404 人卵巢癌細胞 OVCAR-3 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3405 大鼠胸大動脈平滑肌細胞 A7r5 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3406 人皮膚成纖維細胞 HSF 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3407 大鼠腎小球系膜細胞 hbzy-1 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3408 卵巢癌細胞 TOV-21G 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS
ZYC3409 大鼠成骨細胞 ROS1728 形態(tài):貼壁,懸浮均有;上皮細胞樣 培養(yǎng)條件:MEM/F12 +10% FBS