血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中或許含有內(nèi)源性HRP,也會發(fā)作假陽性反應(yīng)。如在冰箱中保存過久,其間的可發(fā)作聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過一周測定的需低溫冰存。凍住血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,散布不均,應(yīng)充沛混勻宜輕緩,防止氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上強烈振動?;鞚峄蛴谐恋淼难鍢?biāo)本應(yīng)先離心或過濾,弄清后再檢測。反復(fù)凍融會使抗體效價下跌,所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作屢次檢測,宜少量分裝冰存。保存血清自收集時就應(yīng)留意無菌操作,也可加入恰當(dāng)防腐劑。
可用作ELISA測定的標(biāo)本非常廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其間某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均平等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只需待血清自然凝固收縮后即可獲得。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)查驗中均以血清作為檢測標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可平等使用。血清標(biāo)本可按常規(guī)辦法收集,應(yīng)留意防止溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,溶血標(biāo)本或許會增加非特異性顯色。