骨髓培養(yǎng)基檢驗(yàn)方法

　　骨髓培養(yǎng)基檢驗(yàn)方法:

　　1. 種骨髓：向裝有10ml培養(yǎng)基的玻璃或塑料瓶中接種0.5ml的骨髓穿刺液，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)管使混合。

　　2. 培養(yǎng)：置37℃二氧化碳細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)72小時。

　　3. 終止培養(yǎng)：向每個培養(yǎng)管中加入秋水仙酰胺溶液，終濃度為0.1ug/ml，靜置15-30分鐘。

　　4. 收獲細(xì)胞：將培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至離心管中，離心力500g，離心5分鐘。

　　5. 低滲處理：除去上清液，加入5-10ml 0.075M KCl溶液重新懸浮細(xì)胞，37℃孵化10-12分鐘。

　　6. 離心：500g，離心5分鐘，棄去上清液。

　　7. 固定：固定液為醋酸：甲醇=1:3，每個離心管中逐滴加入新鮮配制的、預(yù)冷的固定液5-10ml。置于4℃10分鐘。

　　8. 再固定：重復(fù)步驟6和7。

　　9. 滴片：加入0.5-1ml固定液制成懸液。用吸管吸取細(xì)胞懸液，滴至干燥潔凈的載玻片上，空氣中晾干。

　　10. 經(jīng)吉姆薩染色處理后做染色體核型分析。

　　胎兒骨髓培養(yǎng)基保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。細(xì)胞服務(wù)流程：預(yù)約登記→辦理相關(guān)手續(xù)→復(fù)蘇細(xì)胞→細(xì)胞質(zhì)量檢查→發(fā)送細(xì)胞（或自己來取細(xì)胞）→細(xì)胞售后技術(shù)咨詢答疑。