細胞培養(yǎng)中的各種問題解答
在培養(yǎng)細胞的過程中,或許你會有一系列的問題想要問。今天為大家整理了一些關(guān)于細胞的常見問題解答。
一、細胞成長曲線測守時為什么要做重復孔?
答:測定細胞成長曲線細胞計數(shù)時挑選 3 個復孔,每孔分別計三次,取其平均值,目的是減小操作差錯。
二、為什么制作的細胞成長曲線沒有到達平臺期?
答:可能有以下原因:一是細胞接種密度過低;二是細胞培育時刻過短;三是細胞成長狀況欠好,使其不能正常增殖。
三、怎么挑選細胞接種數(shù)?
答:可根據(jù)細胞傳代培育過程中接種數(shù)及細胞成長周期進行核算,細胞接種數(shù)因細胞的不同而不同。
四、細胞計數(shù)時為什么要用臺盼藍染色?
答:參加臺盼藍后,活細胞不上色,臺盼藍上色的細胞呈深藍色,是不健康或已死亡的細胞,不能計數(shù)。
五、測定細胞成長曲線的含義是什么?
答:細胞成長曲線是測定細胞肯定成長數(shù)的常用辦法,也是斷定細胞生機的重要目標,是培育細胞生物學特性的基本參數(shù)。由于細胞太小,無法測單個細胞的成長狀況,所以測細胞集體的成長曲線。
六、細胞成長曲線測定周期是幾天?
答:一般是一個星期。
七、細胞成長曲線還有其他辦法制作嗎?
答:當然有。我們說到zui多的是直接計數(shù)的辦法,除此以外還有相對計數(shù)的辦法,該類辦法首先要制作規(guī)范曲線,標定細胞數(shù)和某個變量的函數(shù),然后我們只需要測定每天這個變量的值便能夠核算出細胞數(shù)。常用的是 MTT、CCK8 等比色的辦法。
八、為什么細胞計數(shù)多天,細胞數(shù)沒有添加反而削減?
答:一般細胞傳代后,會有一個成長緩慢的潛伏期,細胞不增殖,而細胞會有正常的死亡,故細胞數(shù)不添加反而削減。