SNU216人胃癌細(xì)胞
【細(xì)胞縮寫】 SNU216細(xì)胞
【細(xì)胞名稱】 SNU216(人胃癌細(xì)胞)
【背景資料】 見細(xì)胞說明書
【細(xì)胞消化時注意把握消化時間,消化不夠會導(dǎo)致吹打細(xì)胞時造成損傷,一般消化時間是2-3分鐘,但以鏡檢時大部分細(xì)胞縮回球形為準(zhǔn),一般2次即可將細(xì)胞吹打下來,消化不夠進行細(xì)胞吹打易損傷細(xì)胞。細(xì)胞系的凍存液配方:90%FBS+10%DMSO,貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)】 細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國內(nèi)外著名大學(xué)建系
【代次】 P4
【規(guī)格】 復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管(兩支)
【細(xì)胞數(shù)】 1*10(6)
【生物安全級別】 1
【生物體】 人
【組織來源】 胃
【細(xì)胞形態(tài)】 詳見細(xì)胞說明書部分
【細(xì)胞特性】 貼壁
【特別注意:如使用公共實驗室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng),貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng),如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細(xì)胞即時離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決】
SNU216人胃癌細(xì)胞
發(fā)貨方式:
復(fù)蘇后發(fā)貨:我們復(fù)蘇細(xì)胞后發(fā)貨,貨期一周左右,免運費。(氣溫較好建議復(fù)蘇后發(fā)貨)
凍存發(fā)貨(干冰運輸):需額外增加干冰運費,選擇干冰運輸?shù)奈覀儼l(fā)兩管細(xì)胞,為了保證客戶接種可靠性多發(fā)一管。(氣溫低于0℃須凍存發(fā)貨)
細(xì)胞發(fā)貨采取專業(yè)的運輸包裝,并選擇最快捷的運輸方式(順豐速運或其他空運快遞)
細(xì)胞處理方法:
一、貼壁細(xì)胞
1、 接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞 100X,200X 各一張)。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝。
3、嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4、37度平衡1-2小時。
5、用移液管吸取培養(yǎng)基,到50ml離心管中,剩下細(xì)胞密度達到80%至90%可以傳代,如沒有達到添加6ml新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
6、如果肉眼檢查上清有細(xì)胞,對50ml上清進行離心收集細(xì)胞,如果細(xì)胞連片狀態(tài),棄掉上清對收集的細(xì)胞進行胰酶消化(1ml胰酶37度),接種培養(yǎng)。
二、懸浮細(xì)胞
1、接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞 100X,200X 各一張)。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺內(nèi)打開外包裝。
3、嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4、細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5、1000rpm,5min 離心,用吸管小心吸出上清,加入培養(yǎng)基,重懸細(xì)胞。
6、將重懸好的細(xì)胞轉(zhuǎn)入六孔板或者細(xì)胞培養(yǎng)瓶種,加入新鮮培養(yǎng)基,置于 37℃,5%CO2 培養(yǎng)(大部分細(xì)胞)。